1、切記空載(一定要將超聲變幅桿插入樣品后才能開(kāi)機)。
2、變幅桿(超聲探頭)入水深度: 1.5Cm左右,液面高度有30mm以上,探頭要居中,不要貼壁。超聲波是垂直縱波,插入太深不容易形成對流,影響破碎效率。
3、超聲參數設置:設置鍵好儀器工作參數,對于對溫度要求比較敏感的樣品(比如細菌)一般外面采用冰浴,實(shí)際溫度肯定是低于25度,蛋白核酸肯定不會(huì )變性。
1)時(shí)間:超聲時(shí)間每次不要超過(guò)5秒,間隙時(shí)間應大于或等于超聲時(shí)間,以便于熱量散發(fā)。時(shí)間設定應以超聲時(shí)間短,超聲次數多原則,可延長(cháng)超聲機子以及探頭的壽命。
2)超聲功率:不宜太大,以免樣品飛濺或起泡沫,如小于10ml樣品容量,功率應在200w以?xún)?選用2mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿選擇開(kāi)關(guān)打到相應擋;10-200ml樣品容量的功率在200-400w,選用6mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應擋;200ml以上的樣品容量功率在300-600w之間,選用10mm超聲探頭,另將面板后面的變幅桿打到相應擋;(2MM的小探頭功率嚴禁超過(guò)350W)。
3) 容器選擇:有多少的樣品就選多大的燒杯,這樣也是有利樣品在超聲中對流,提高破碎效率。例如;20mL的處理量用20mL的燒杯。如100ml大腸桿菌樣品設置參數:超聲5秒 /間隙5秒次數70次(總時(shí)間為10分鐘)。功率300W(僅供參考),500ML左右的量,功率開(kāi)到500W-800W左右
4、若樣品放在1.5ml的EP管里請一定要將EP管固定好,以防冰浴融化后液面下降導致空載
5、日常保養:用完后用酒精擦洗探頭或用清水進(jìn)行超聲.